共面向量系数和为1证明_如何使用共聚焦显微镜LSM780/880进行共定位实验

作者：Gausst松鼠会 | 2024-04-24 03:56:21

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mander's coefficient

近期多位同学有共定位分析的实验需求，今天和大家聊一聊如何使用我平台的共聚焦显微镜Zeiss LSM780/880进行共定位实验。

实验要求

1、所要分析的两种共定位染料不能有串色。

减少串色的手段包括：

2、设置通道时，两通道使用相同的Pinhole大小。Pinhole不同会导致两通道的光切厚度不同，进而使信号的空间定位有偏差。

3、荧光亮度不能过曝。所有定量分析的实验都要求信号不能过饱和。

4、使用平场复消色差物镜来拍摄，并且尽量选择数值孔径高的镜头。

如何进行共定位实验

1、准备两种单标样品和待分析的共定位样品。

2、使用相同的参数分别拍摄三种样品，得到三张图片。

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